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293t细胞(293t细胞培养说明书)

老井百科 老井百科 2022-10-05 【头条资讯】 305人已围观

摘要本篇文章给大家谈谈293t细胞,以及293t细胞培养说明书对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。本文目录一览:1、如何养293、293T系列的细胞?

本篇文章给大家谈谈293t细胞,以及293t细胞培养说明书对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。

本文目录一览:

如何养293、293T系列的细胞?

将细胞培养瓶竖立放置,吸走培养基,如果培养基中的脱落细胞较多,说明细胞现在很容易脱落,只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%),来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落,加入10mlMEM,混匀,不能吹打,分装2瓶。

如果细胞没长满就脱落,则只需加入5mlMEM,不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固,培养基上清没有细胞脱落碎片,且细胞长满达到80%以上,吸走培养基,加入5ml的PBS+EDTA(0.02%),迅速轻微晃动,竖立培养瓶,吸走,加入1ml0.05%胰酶,37度消化不超过3min。

扩展资料:

注意事项:

1、尽量用早期的细胞,传代太多状态不好,产毒也不好,贴壁困难。

2、塑料的瓶子,DMEM +10%的小牛血清即可,要求并不高,ATCC上有详细的培养方法。

3、主要是传代,胰酶消化点到即止,不能和其它成纤维细胞一样。

4、细胞代数越高生长越快,同时性状和原代差别也更大。一般2-3天传代一次比较合适。

5、传代时细胞密度在80%左右比较好,如果超过90%融合再传会影响细胞状态。

参考资料来源:百度百科-293细胞

p293t细胞是什么细胞

293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。

293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。

293t是什么细胞?

肾上皮细胞。

293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

扩展资料:

注意事项:

在原代培养初期,培养液的含量在3ML以下,最适宜的为1-1.5ML,仅够保持植块湿润即可。

在扔入垃圾前,应该用次氯酸盐处理剩余组织和使用过的试管、吸管、培养皿。

培养液需要在无菌的环境下才能打开,避免污染。

参考资料来源:百度百科-肾小管上皮细胞

293T细胞为什么经常用于转染、蛋白质表达?

许多真核表达载体如pcDNA3.1中含有SV40病毒的复制起始位点,可以在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制,从而提高外源基因的表达水平。293T细胞就是一种表达SV40病毒T抗原的细胞系,它来源于人胚胎肾细胞293HEK。

经改造后在其中插入了T抗原,因此用293T细胞做转染可以获得较高的表达水平。 293T细胞也可以作为普通的哺乳细胞用于筛选稳定表达的细胞系,不过它贴壁性差,容易脱落,不利于筛选。 3T3细胞是小鼠胚胎成纤维细胞系,它具有明显的接触抑制作用,所以易于识别已发生转化的细胞。

293细胞是人肾上皮细胞系,有多种衍生株,比如HEK293,293T/17等,来源都是人胚胎肾细胞,其极少表达细胞外配体所需的内生受体,且比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。

293T细胞由293细胞通过基因技术派生出的细胞系,是经过腺病毒E1A基因的转染,能表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区。

扩展资料:

293T细胞的转染技术:

常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。

一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。

尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸转移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。

参考资料来源:百度百科-T淋巴细胞

参考资料来源:百度百科-239细胞

参考资料来源:百度百科-转染

293t细胞是什么细胞

293t细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

293t是什么细胞

293t是淋巴细胞,293T细胞由293细胞通过基因技术派生出的细胞系,是经过腺病毒E1A基因的转染,能表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区。

淋巴细胞是白细胞的一种,是体积最小的白细胞。其由淋巴器官产生,主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中,是机体免疫应答功能的重要细胞成分,是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者,是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵”。

293t细胞的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于293t细胞培养说明书、293t细胞的信息别忘了在本站进行查找喔。

Tags: 293t细胞

文章评论 (有 5 条评论,305人围观)

张三 游客 2022-10-06 回复该评论
293细胞通过基因技术派生出的细胞系,是经过腺病毒E1A基因的转染,能表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区。扩展资料:293T细胞的转染技术:常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主

张三 游客 2022-10-06 回复该评论
助检测。后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标

王五 游客 2022-10-06 回复该评论
PBS+EDTA(0.02%),来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落,加入10mlMEM,混匀,不能吹打,分装2瓶。如果细胞没长满就脱落,则只需加入5mlMEM,不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固,培养基上清没有细胞脱落碎片

王五 游客 2022-10-06 回复该评论
直到细胞完全脱落,加入10mlMEM,混匀,不能吹打,分装2瓶。如果细胞没长满就脱落,则只需加入5mlMEM,不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固,培养基上清没有细胞

李四 游客 2022-10-06 回复该评论
40复制起始点与启动子区。扩展资料:293T细胞的转染技术:常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋

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